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cas:72040-63-2,Biotin-LC-NHS,生物素-X,琥珀酰亞胺酯的概述

2025-10-28 [32]

Biotin-LC-NHS 是一種廣泛應用于生物化學和分子生物學領域的生物素化試劑,其核心功能是將生物素分子共價連接到含氨基(-NH?)的生物分子上,如蛋白質、抗體和核酸等。

化學結構與組成

Biotin-LC-NHS 的核心結構由三部分組成:

  1. 生物素(Biotin):一種水溶性、非毒性維生素(維生素H或B7),具有與親和素(Streptavidin)或鏈霉親和素(Avidin)高親和力結合的特性,結合親和常數較高(Kd ~10?1? M),確保標記分子與靶分子形成穩定復合物。

  2. 長鏈間隔臂(LC, Long Chain):通常是一個由6-12個碳原子組成的柔性鏈狀結構,如6-氨基己酸長鏈。其作用是增加生物素與目標分子之間的距離,減少空間位阻,提高標記效率,同時保持標記分子的生物活性。

  3. 活性N-羥基琥珀酰亞胺酯(NHS):分子末端的NHS酯能與蛋白質或多肽中的自由氨基(如賴氨酸殘基)進行共價偶聯,形成穩定的酰胺鍵。NHS酯在水溶液中水解速率可控,需在pH 7–9的緩沖液中操作以確保反應效率。

物理與化學性質

  • 外觀:通常為白色至淺黃色固體。

  • 溶解性:易溶于有機溶劑如二甲基亞砜(DMSO)、乙腈或二氯甲烷,同時在水相中緩慢水解。

  • 穩定性:在干燥、有機溶劑或低溫條件下相對穩定,可長期儲存。但在水溶液中易水解,需在使用前新鮮配制或在有機溶劑中保存。

功能與應用

  1. 蛋白質標記

    • 用于標記抗體、酶等蛋白質,便于后續的檢測或純化。

    • 標記后的蛋白仍保持結構完整性和生物活性,廣泛用于免疫學實驗中抗體或蛋白質的高效標記,如ELISA、Western blot、免疫沉淀等。

  2. 核酸標記

    • 標記DNA或RNA,用于雜交實驗或測序。

  3. 細胞表面標記

    • 標記細胞表面的蛋白質,研究細胞間相互作用。

  4. 分子捕獲與純化

    • 通過親和素磁珠或親和層析,實現蛋白或核酸分子的高效捕獲和純化。

  5. 生物傳感器和芯片技術

    • 在生物傳感器和蛋白質芯片中,用于穩定固定蛋白或配體,實現高靈敏檢測。

  6. 藥物遞送與靶向研究

    • 用于構建生物素-親和素系統的藥物遞送平臺,實現靶向治療或分子追蹤。

使用注意事項

  • 儲存條件:建議儲存于-20°C的干燥環境中,避光避濕,以保持試劑的穩定性和活性。

  • 溶解試劑:將Biotin-LC-NHS溶解在無水DMSO或DMF中,確保全溶解。

  • 反應條件:將溶解后的試劑與目標分子(如蛋白質或核酸)在pH 7-9的緩沖液中混合,室溫或4℃反應1-2小時。

  • 純化:通過透析、凝膠過濾或親和層析去除未反應的試劑。

  • 安全警示:僅用于科研,不能用于人體。

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溫馨提示:僅用于科研,不能用于人體!

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